Knudsonovo médium pre orchidey

Knudsonovo médium je umelé živné médium vyvinuté v roku 1946 americkým botanikom Lewisom Knudsonom na klíčenie semien orchideí a podporu rastu v sterilných podmienkach. Je to jedno z najpoužívanejších médií na pestovanie orchideí in vitro a je obľúbené pre laboratórne aj domáce použitie.

Čo je Knudsonovo médium?

Orchidey prirodzene rastú v symbióze s mykoríznymi hubami, ktoré im poskytujú základné živiny. Reprodukcia tejto symbiózy v laboratórnych podmienkach je však nemožná. Knudsonovo médium bolo vyvinuté ako náhrada bohatá na živiny, ktorá dodáva všetky základné prvky potrebné pre klíčenie semien a rast sadeníc.

Zloženie knudsonovho média

Štandardný vzorec obsahuje:

• Cukor: primárny zdroj energie.
• Minerálne soli:
  • Dusičnan draselný (kNO₃) – zdroj dusíka.
  • Síran horečnatý (mgso₄) – dodáva horčík a síru.
  • Dihydrogenfosforečnan draselný (kh₂po₄) – dodáva fosfor a draslík.
  • Chlorid vápenatý (cacl₂) – zdroj vápnika.
• Vitamíny:
  • Kyselina nikotínová, tiamín a pyridoxín na aktiváciu metabolických procesov.
  • Železo, zinok, mangán a ďalšie prvky nevyhnutné pre vývoj tkanív.
  • Agar-agar na vytvorenie pevného média, ktoré zabraňuje potopeniu semien alebo sadeníc.
• Stopové prvky:
• Želírujúce látky:

Výhody použitia knudsonovho média

1. Stimuluje klíčenie semien:
   • Poskytuje všetky potrebné živiny pre klíčenie a nahrádza tak potrebu hubovej symbiózy.
2. Sterilné prostredie:
   • Vytvára ideálne podmienky pre rast bez rizika bakteriálnej alebo hubovej kontaminácie.
3. Optimálne podmienky rastu:
   • Podporuje vývoj sadeníc, kým nie sú pripravené na presadenie do substrátu.
4. Vhodné pre rôzne druhy orchideí:
   • Receptúru je možné upraviť tak, aby vyhovovala špecifickým potrebám rôznych druhov orchideí.

Aplikácie knudsonovho média

1. Klíčenie semien:
   • Semená orchideí sa sterilizujú (zvyčajne roztokom chlórnanu sodného).
   • Sterilné semená sa umiestnia na povrch živného média v Petriho miskách alebo skúmavkách.
2. Rast sadeníc:
   • Médium podporuje vývoj sadeníc, kým sa neobjavia listy a počiatočný koreňový systém.
3. Presádzanie do substrátu:
   • Keď sadenice dosiahnu vhodnú veľkosť, presadia sa do vhodného substrátu (napr. kôra, rašeliníkový mach).

Ako pripraviť Knudsonovo médium?

Zloženie (príklad na 1 liter):

• Agar-agar: 10 g
• Cukor: 20 g
• Kh₂PO₄: 250 mg
• MgSO₄·7h₂o: 250 mg
• Cacl₂·2h₂o: 250 mg
• Kno₃: 500 mg
• Vitamíny (tiamín, kyselina nikotínová): 1 mg každý
• Mikroelementy (napr. Feso₄): 1–2 mg
• Destilovaná voda: 1 l

Kroky:

1. Všetky zložky rozpustite v destilovanej vode.
2. Pridajte agar-agar a zahrievajte, kým sa úplne nerozpustí.
3. Roztok nalejte do sterilných nádob (Petriho misky, skúmavky).
4. Médium sterilizujte v autokláve alebo vodnom kúpeli (15 minút pri 121 °C).
5. Médium nechajte stuhnúť.

Tipy na používanie knudsonovho média

1. Zachovanie sterility:
   • Pracujte v sterilných podmienkach, aby ste predišli kontaminácii.
2. Monitorovaná teplota:
   • Kultúry uchovávajte pri teplote +20–25 °C.
3. Zabezpečte dostatočné svetlo:
   • Zabezpečte mäkké, rozptýlené osvetlenie po dobu 12–14 hodín denne.
4. Presádzanie:
   • Sadenice presaďte do substrátu, keď sú dostatočne veľké na samostatný rast.

Záver

Knudsonovo médium je kľúčovým nástrojom pre úspešné klíčenie semien orchideí a pestovanie zdravých sadeníc. Poskytuje dokonalú rovnováhu živín pre rast, čím eliminuje potrebu hubovej symbiózy. Toto médium je ideálne na rozmnožovanie vzácnych a dekoratívnych druhov orchideí, či už v laboratóriu alebo doma.